程颖：循环蛋白质在小蛋白质肺癌临床研究中的进展

循环系统线粒体( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“混合物活检标本”，已在转回开放性胰腺癌、癌和结直肠癌中会用于病状赞誉。小线粒体肺炎(Small celllung cancer，SCLC)一个组织标本来源不足，且不足必要的天气预报罹患转回和预测病状的生物遥相呼应。近些年深入历史学者CTCs在SCLC中会的诊疗应用信息核心技术进不依了基础开放性深入研究，发掘出CTCs对SCLC的检验、已确定，天气预报罹患、转回，评估、病状以及建立空无用药应对方案等较强关键开放性意义，本文就CTCs在SCLC诊疗应用信息核心技术中会的深入研究进展为由综述。

一、SCLC病患CTCs的侦测原理则

CTCs的侦测原理则主要有流式线粒体侦测核心技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶低质量(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)核心技术和膜切片分离线粒体核心技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中会CellSearch系统因其半自动化的操控游戏平台，极低的抗体、敏感开放性和可重复开放性，视作最常应用信息核心技术的CTCs侦测原理则。

要到在2004年，Allard等率先应用信息核心技术CelISearch法则侦测了99举例肺炎（从未列举SCLC举例数）病患的CTCs，随后Nagrath等改用CTC-chip法则侦测了55举例肺炎病患外周尸C TCs。2009年以后的深入研究多改用CeIISearch法则侦测SCI．C病患外周尸CTCs，然而该原理则由于对不足上皮线粒体特质的线粒体会再次出现漏检可能，且与抗病毒磁珠及抗体紧密结合的CTCs未能则不依某些后续的侦测，诊疗应用信息核心技术受到上都。

近些年，随着碳纳米管科技的工业发展，抗病毒CTCs表面遥相呼应的抗体识别分f标记的碳纳米管材料紧密结合旋流控核心技术的CTCs侦测游戏平台的深入研究受到最常关注，2013年，《纯净》（Nature）杂志将CTCs碳纳米管侦测选为最具创新开放性和转换成潜力的检验新原理则，成果大放异彩。但就目前来看，现有的CTCs侦测原理则各有利弊，从未有深入研究证实哪种原理则对SCLC的CTCs侦测越来越有优势。着眼下一代，亟需要开发抗体、敏感开放性越来越佳的CTCs侦测核心技术，为SCLC的基础和诊疗深入研究随之而来突破。

二、CTCs在SCLC诊疗应用信息核心技术中会的深入研究现状

（一）CTCs可用与SCLC的检验、已确定

近些年多项深入研究推断CTCs可用准确度与SCLC的检验、已确定有紧密联系0 2009年Tanaka等应用信息核心技术CeIISearch法则侦测了1 50举例7.5ml外周尸CTCs，其中会肺炎1 25举例、非恶开放性25举例，肺炎病患最主要116举例非小线粒体肺炎(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9举例SCLC。

深入研究近来SCLC病患CTCs阳开放性率为66.70-/0（6举例／9举例），明显高于NSCLC病患的CTCs阳开放性率(腺癌25.9%，鳞癌40.9%；腺癌对比SCLC，P

同年，Hou等应用信息核心技术CeIISearch法则侦测了50举例初治的SCLC病患外周尸CTCs，最主要20举例上都期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患和30举例最常期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患，弧期ED-SCLC及LD-SCLC病患的中会位CTCs可用则有237和2个/7.5ml尸，7举例从未检出CTCs的病患均为LD-SCLC，证明CTCs可用准确度与SCLC已确定关的。

近似于的论据在2012年被日本深入历史学者Naito等证实，深入历史学者在51举例SCLC病患中会立用CeIISearch法则侦测弧期CTCs准确度，近来ED-SCLC,病患的中会位CTCs可用为9.5个f 7.5ml尸，而LD-SCLC仅为1个／7.51111尸，进一步证明ED-SCLC病患的CTCs准确度高于LD-SCLC病患。

（二）CTCs评估SCLC的及病状

CTCs到底可作为评估SCLC和病状的有救所指f,匙深入历史学者们一直在探讨的问题。Houi等在2009年通过CellSearch法则侦测了50举例SCLC病患(LD-SCLC20举例，ED-SCLC30举例)的CTCs，发掘出CTCs>300个/7.5ml尸的病患及CTCs

弧期CTCs>=50和

在该深入研究中会SCLC病患的病状界瞬时旧版8个/7.5ml尸，以此将病患分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样应用信息核心技术CellSearch法则侦测59举例SCLC病患在弧期、1短周期化学疗法则后及4短周期化学疗法则结束后外固尸CTCs准确度，其中会ED-SCLC病患38举例，LD-SCLC病患2 1举例c弧期有43举例病患(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml尸，CTCs>215个/7.5ml尸和CTCs

经过1短周期化学疗法则后病患CTCs准确度明显降低，且1短周期化学疗法则后CTCs

深入历史学者推断CTCs准确度是SCLC病状的统一影响特异性，其中会1短周期化学疗法则后CTCs准确度是SCLC和病状最强的预测特异性。

2013年ASCO发表的ECOG1508深入研究中会，深入历史学者越来越进一步在155举例ED-SCLC中会自组抗病毒用药，并对其中会123举例病患弧期CTCs进不依侦测，近来抗病毒用药没法则延长ED-SCLC病患的PFS和OS，但发掘出弧期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml尸的mPFS则有4.4和4.3个同年（P=0.07），OS则有10.7和7.2个同年(P=0.01)。深入历史学者认为虽然抗病毒用药没能进一步提高ED-SCLC病患的PFS和OS，但却发掘出了CTCs可能是SCLC病患的病状遥相呼应。

近来，Igawa等越来越进一步应用信息核心技术OBP-401次测试侦测SCLC病患外周尸CTCso应用信息核心技术OBP-401次测试侦测胰腺癌和胃癌病患CTCs的关的深入研究已有前期报道。深入研究纳入30举例韧治的SCLC病患，29举例病患(96%)外周尸CTCs阳开放性。在弧期，21举例病患CTCs

（三）CTCs天气预报SCLC的罹患和转回

现有的深入研究表明通过侦测CTCs的再次出现来天气预报SCLC的罹患和转回较强关键开放性的诊疗意义o Tanaka等深入研究发掘出CTCs准确度‘j 125举例肺炎病患（最主要9举例SCLC病患）进展明显关的，特别是与高处转回密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些资料，著者认为CTCs可作为天气预报肺炎高处转回的生物标记物。Natio等深入研究发掘出SCLC在弧期、用药结束后及罹患后CTCs的阳开放性率则有68.6%、26.5%和67.6，定时SCLC罹患后外周学CTCs准确度升高，频发高处转回脏器的为数为0、1和>=2的病患其中会位CTCs可用则有2.0、7.5和21个/7.5ml尸,定时CTCs准确度与高处转回脏器的为数有关，高处转回越多，CTCs可用越少（p

三、CTCs在SCLC诊疗应用信息核心技术中会的追寻斜向

罹患和转回是导致病患用药失败和被害的主要主因，立刻发掘出的罹患和转回并采敢积极必要的用药措施可显著进一步提高病患增重。然而，由于SCLC不足能够天气预报罹患和转回的生物遥相呼应，且常规常规检查未能则发掘出旋转回灶及表面残留病灶，导致频发罹患和转回的SCLC病患不用立刻接受检验和用药。

诊疗中会部分LD-SCLC的病患病状差异很大，定时有些上都期的病患在检验时可能已频发了常规不用发掘出的旋转回而视作潜在的最常期病患。通过侦测外周尸CTCs的再次出现及为数发生变化从而对SCLC病患细胞内完全进不依即时、动态地天气预报和赞誉，立刻发掘出的罹患、转回，将有助于诊疗医生对用药良机的把握和用药应对应对方案的选择，但究竟CTCs的为数或发生变化取值为多少时能够准确反映SCLC的罹患或转回尚不明确，需要要越来越多的循证医学确凿证据为由支持。

CTCs在评估SCLC病患用药多方面的应用信息核心技术尚西北面追寻下一阶段，用药过程中会CTCs为数的发生变化与SCLC病患化学疗法则的关的开放性及其与SCLC病患化疗良机的选择等问题在下一代需要大量的诊疗深入研究。近5年，对CTCs到底可作为SCLC病患病状所指标的深入研究日益增多，但SCLC最佳的病状CTCs界瞬时尚无定论，争论颇多。

其中会3项来自Hou、Naito、Hiltermann的深入研究将SCLC的病状CTCs畀瞬时分别旧版为50、8和2个／7.5ml尸，差异很大，这可能与深入研究改用的统计学原理则不尽相同以及入组样本量较少有关。近期西西里岛深入历史学者Normanno等观点将ED-SCLC和LD-SCLC病患分开深入研究，对弧期、l短周期化学疗法则后CTCs以及用药前后CTCs的发生变化取值分别旧版病状界瞬时，为下一代的深入研究提供了新思路。笔者所在的科研设计团队也正致力于而今SCLC病患病状最佳CTCs界瞬时的深入研究，结果最让人期待。

的空无用药是用药模式的工业发展斜向。SCLC病患对化学疗法则药物的反应长期存在明显的个体差异，其主要主因可能与复杂的异质开放性、基因序列表达差异及多态开放性有关。所以，逐步严谨SCLC的遗传物质学特质对实现真正意义上的SCLC空无用药尤为关键开放性。近期而今深入历史学者王洁等深入研究人员通过应用信息核心技术单线粒体基因序列人类基因组计划手段对病患单个CTC进不依全遗传物质、外显子遗传物质人类基因组计划。

在此项深入研究中会，谢晓亮教授发明的多重退火和环化循环系统的扩增核心技术(MAIBAC)，成功实现了对病患外周尸单个CTC的全遗传物质扩增和深度人类基因组计划，在单个线粒体准确度侦测全遗传物质基因序列拷贝数相异(CNVs)和单核苷酸相异(SNVs)o单线粒体准确度CTCs遗传物质人类基因组计划核心技术可立刻提供如病毒性基因序列突变等空无用药所需要的关键开放性信息，同时也为下一代SCLC抗病毒药物的开发提供核心技术开发。

SCLC一个组织标本难以获取，管制了后续各项常规深入研究的开展，而利用CTCs构建的SCLC循环系统线粒体移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)假设，从未来会应对这一棘手难题。近来，Hodgkinson等越来越进一步将6举例ED-SCLC病患lOml外周尸中会的CTCs提取后注射到抗病毒缺陷人细胞内腹膜，结果在4只人细胞内身上产生了CDXs，证明SCLC病患的CTCs较强致瘤开放性。

同时应用信息核心技术CelISearch法则侦测这6举例SCLC病患的CTCs，近来成功产生CDXs的4举例病患的CTCs可用均>400个／7.5ml尸，而另外2举例从未产生CDXs的病患其CTCs可用则有222和20个／7.5ml尸，定时SCLC的CTCs致瘤开放性与外周尸CTCs教量有关。进一步研究发掘出来得于化学疗法则敏感开放性SCLC，化学疗法则病毒性开放性SCLC病患的CDXs倍增时间较短、生长越来越不断。对3举例CDXs得到顺铂和依托泊苷化学疗法则药物，其敏感开放性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病患的OS则有9.7.3.5.0.9个同年，定时对CDXs进不依体外药敏次测试可以间接反应病患求生时间。

该深入研究推断部分SCLC的外周尸CTCs较强干线粒体特开放性，可进不依体外培育出、产生与原发高度近似于的CDXs，为SCLC病患的体外药敏次测试、病毒性有助于研究等一系列常规深入研究提供了足量的一个组织，应对了SCLC病患标本来源不足的问题。

论据

从现不依的深入研究可以看得出，虽然CTCs在SCLC中会的诊疗应用信息核心技术仍西北面追寻下一阶段，但前景宽阔。目前，诸多转换成开放性深入研究正在进不依中会，无论如何随着深入研究的不断深入，CTCs从未来会视作SCLC的突破口，期待CTCs在SCLC的信息核心技术中会为我们随之而来惊喜。

撰稿人： 喜